Stanovení žlučových kyselin v bronchoalveolární laváži pacientů po transplantaci plic

Abstract

Transplantace plic je život zachraňující metodou léčby pro pacienty trpícím plicním selháním. Medián přežití pacientů po tomto zákroku je ovšem stále nízký (6 let). Hlavním důvodem je především plicní aloštěpová dysfunkce, která může vést až k odmítnutí transplantované štěpu. Mezi hlavní rizikové faktory této dysfunkce byl identifikován gastroezofageální reflux (některé studie uvádí i duodenogastroezofageální reflux), který se prokazatelně zhoršuje právě po transplantaci plic. Mezi markery gastroezofageálního refluxu se může řadit bilirubin, pepsinogen II (některé studie uvádí pepsin), pH a žlučové kyseliny. Všechny tyto markery byly v této práci stanoveny na skupině vzorků bronchoalveolární laváže a porovnávány mezi sebou i s klinickými údaji, které klasifikují postupné zhoršení funkce plic po transplantaci. Po měření vzorků na LC- MS/MS bylo zjištěno, že celková koncentrace žlučových kyselin měřených enzymatickým testem neodpovídá celkové koncentraci žlučových kyselin měřených kapalinovou chromatografií. Vzorky byly podrobeny hydrolýze a solvolýze pro zjištění, zda není disproporce v obou metodách způsobena atypickou konjugovanou či sulfatovanou žlučovou kyselinou. Byly zjištěny významné korelace mezi klinickými údaji a koncentrací žlučových kyselin a také mezi klinickými údaji a pH. Necílenou...

Lung transplantation is a life-saving treatment for patients suffering from lung failure. However, the median survival of patients after this procedure is still low (6 years). The main reason is mainly due to chronic lung allograft dysfunction, which can lead to graft rejection. Gastroesophageal reflux has been identified as a major risk factor for this dysfunction (some studies also report duodenogastroesophageal reflux), which has been shown to worsen after lung transplantation. Markers of gastroesophageal reflux may include bilirubin, pepsinogen II (some studies report pepsin), pH and bile acids. In this study, all these markers were determined in a cohort of bronchoalveolar lavage samples and compared with each other and with clinical data that classify progressive deterioration of lung function after transplantation. After measuring the samples by LC-MS/MS, it was found that the total bile acid concentration measured by the enzymatic assay did not match the total bile acid concentration measured by liquid chromatography. The samples were subjected to hydrolysis and solvolysis to determine whether the disproportionation in the two methods was due to atypical conjugated or sulphated bile acids. Significant correlations were found between clinical data and bile acid concentrations and between...