Role řízené tkáňově-specifcké produkce ISWI proteinu Smarca5/Snf2h v myší krvetvorbě.

Abstract

Proces diferenciace krvetvorných buněk je závislý na chromatin-remodelační aktivitě ISWI ATPázy SMARCA5 (SNF2H) a jejích komplexů. Pro studium funkcí této ATPázy jsme v naší laboratoři vyvinuli řadu myších modelů, počínaje modelem s konstitutivní delecí genu Smarca5 a na něj navazujícími modely s kondicionální delecí tohoto genu v závislosti na tkáňově specificky exprimované Cre rekombináze (zejména v různých stádiích krvetvorby). Závažnost fenotypových projevů u myších modelů se různí od brzké embryonální letality konstitutivního delečního modelu, přes fetální letalitu spojenou se selháním erytropoézy (Vav1iCre model - delece v definitivním hematopoetickém progenitoru) až po poruchy lymfopoézy neomezující přežití zvířat (hCD2iCre model - delece v T a B lymfocytech) u kondicionálně delečních modelů. Tato práce navazuje na pozorování získaná při studiu delečních modelů genu Smarca5, tedy že delece vede k zástavě dělení buněk a jejich vstupu do apoptózy. Defekty byly pozorovány už ve stádiu kmenových buněk a hematopoetických progenitorů, které nebyly schopné vstoupit do procesu diferenciace v nepřítomnosti SMARCA5 proteinu. V těchto modelech kvůli tomu nebylo možné studovat průběh diferenciace. Proto jsme se rozhodli vytvořit nový myší model s hypomorfní (exprimující nižší množství proteinu)...

The process of cell differentiation is dependent on the chromatin-remodeling activity of the ISWI ATPase SMARCA5 (SNF2H) and its complexes. A series of mouse models have been used to study the functions of this ATPase, starting with a model with constitutive deletion of the Smarca5 gene and followed by models with tissue-specific deletion of Smarca5 gene (especially at different stages of hematopoiesis). The severity of phenotypic manifestations in mouse models varies from early embryonic lethality in the constitutive deletion model, through fetal lethality associated with erythropoiesis failure (Vav1iCre model - deletion in the definitive hematopoietic progenitor) to lymphopoiesis defects that do not limit animal survival (hCD2iCre model - deletion in T and B lymphocytes) in conditional deletion models. This work builds on the observations obtained in the study of deletion models of this Smarca5 gene, i.e. that deletion leads to arrest of cell proliferation and their entry into apoptosis. Defects were observed already at the stem cell and hematopoietic progenitor stages, which were unable to enter the differentiation process in the absence of the SMARCA5 protein. In these models, it was not possible to study the progression of differentiation because of this reason. Therefore, we decided to create...