Poškození DNA spermií: metody detekce využívané v klinické praxi

Abstract

Současná rutinní analýza spermatu, známá jako spermiogram, není schopna poskytnout úplný obraz o mužské plodnosti, jelikož standardně nezahrnuje hodnocení integrity DNA. Tento parametr úzce souvisí s potížemi během početí a se zvýšeným rizikem potratu. Tato práce se zabývá příčinami vzniku poškození DNA spermií, detekcí tohoto poškození pomocí různých metod a závěrem diskutuje o možnostech začlenění těchto testů do klinické praxe za účelem zlepšení hodnocení a léčby mužské plodnosti. Mezi mechanismy vzniku fragmentace DNA spermií patří narušení spermiogeneze, oxidativní stres a poruchy apoptózy, které mohou být ovlivněny genetickými, anatomickými i vnějšími faktory. Hlavní část práce byla věnována rešerši metod detekce fragmentace DNA spermií, zahrnující analýzu struktury chromatinu spermií (SCSA), test disperze chromatinu spermií (SCD), metodu TUNEL, test na základě rozpoznání jednořetězcových zlomů DNA (ISNT), kometovou analýzu a barvení chromatinu. Přestože jsou některé z těchto metod často používané, stále zůstávají výzvy v jejich standardizaci a plném začlenění do klinické praxe. Možnost jejich rutinního využití by však mohla přinést významné pokroky v diagnostice a léčbě mužské neplodnosti. Mezi testy s největším potenciálem pro rutinní začlenění patří SCSA, TUNEL či SCD, a to díky jejich...

The current routine semen analysis, known as a spermiogram, is not able to provide a complete picture of male fertility as it does not routinely include an assessment of DNA integrity. This parameter is closely related to difficulties during conception and increased risk of miscarriage. This paper discusses the causes of sperm DNA damage, the detection of this damage by various methods and concludes with a discussion of the possibilities of incorporating these tests into clinical practice to improve the assessment and treatment of male fertility. Mechanisms of sperm DNA fragmentation include impaired spermatogenesis, oxidative stress and impaired apoptosis, which can be influenced by genetic, anatomical and external factors. The main part of this thesis was devoted to a review of methods for the detection of sperm DNA fragmentation, including sperm chromatin structure analysis (SCSA), sperm chromatin dispersion test (SCD), TUNEL method, single-strand DNA break recognition test (ISNT), comet assay and chromatin staining. Although some of these methods are frequently used, challenges remain in their standardization and full integration into clinical practice. However, the possibility of their routine use could bring significant advances in the diagnosis and treatment of male infertility. Among the...