Velmi rychlá elektroforetická stanovení klinicky významných látek v tělních tekutinách.

Abstract

Pro přímé stanovení polyalkoholů glycerolu a mannitolu v biologických a farmakologických vzorcích byla vyvinuta metoda kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí. V optimalizovaném základním elektrolytu o složení 60 mM H3BO3 + 30 mM LiOH (pH 9,1) dochází k úplnému oddělení glycerolu i mannitolu od zóny elektroneutrálních látek v krátkém čase (3,0 min. pro glycerol a 3,9 min. pro mannitol). Limit detekce stanovení je 0,5 µmol.l-1 pro glycerol a 0,3 µmol.l-1 pro mannitol. Opakovatelnost stanovení je 0,5 % pro migrační čas a 3,2 % pro plochu píku. Tato metoda byla použita pro monitorování koncentrace volného glycerolu v mikrodialyzátu tukové tkáně. Fyziologická studie prokázala, že lipolýzu lze během sportovního výkonu stimulovat lokální aplikací adrenalinu. Vypracovaná metoda byla dále aplikována pro stanovení mannitolu ve farmakologickém preparátu.

A capillary electrophoretic procedure employing contactless conductivity detection (C4 D) has been developed for direct determination of the glycerol and mannitol polyalcohols in biological and pharmacological samples. Both glycerol and mannitol are fully separated from the sample matrix within very short times of 3.0 and 3.9 min., respectively, when using the optimized background electrolyte, 60 mM H3BO3 + 30 mM LiOH (pH 9.1). The limits of detection amount to 0.5 µM for glycerol and 0.3 µM for mannitol. The repeatability of the glycerol determination in real biological materials is characterized by the coefficient of variation values, 0.5 % and 3.2 %, for the migration time and the peak area, respectively. The procedure has been used to monitor the free glycerol concentration in adipose tissue microdialyzates. A physiological study has demonstrated that the lipolysis occurring during a sporting action can be stimulated by local application of adrenaline. The procedure has further been utilized to determine mannitol in a pharmacological preparation.