Imunologické testování kombinovaných LELTE / sacharidových dendrimerů

Abstract

Imunologické testování kombinovaných LELTE / sacharidových dendrimerů. Alan Kádek (Katedra biochemie, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova v Praze, Česká republika) CD69 je široce rozšířený receptor buněk imunitního systému. Přestože jeho fyziologický ligand není dosud znám, byla v Laboratoři architektury proteinů zjištěna jeho afinita k řadě látek včetně vápenatých iontů, sacharidů a záporně nabitých látek jako jsou karboxylované kalixareny. Nedávno byla též jako ligand CD69 identifikována pentapeptidová sekvence LELTE, pocházející z mykobakteriálního chaperoninu Hsp65, která představuje pro imunitní systém signál o nebezpečí. Tento peptid ovšem není imunoaktivní samostatně, ale pouze při prezentaci v multivalentním prostředí Hsp65 proteinu nebo po umělé dimerizaci za použití bi- či polyfunkčních činidel. V předkládané práci zkoumám u čtyř nově syntetizovaných látek jejich in vitro immunologické efekty na buněčnou signalizaci, proliferaci, přirozené zabíjení nádorových buněk a na indukci apoptosy v imunocytech. Testované látky prezentují LELTE peptid připojený skrze ε-aminoskupiny lysinů na cyklopeptidické RAFT kostře (K-K-K-P-G)2, a to jak samostatně, tak v kombinaci se sacharidovým epitopem α-GalNAc. Schopnost těchto látek aktivovat lidské PBMC lymfocyty je zejména zvýšená u látek,...

Immunological testing of combined LELTE / saccharide dendrimers. (in Czech) Alan Kádek (Department of Biochemistry, Faculty of Science, Charles University, Prague, Czech Republic) CD69 is a widespread receptor of the immune system cells. Although a physiological ligand for this receptor is still unknown, in Laboratory of protein architecture its affinity towards a range of compounds including calcium, carbohydrates and charged compounds such as carboxylated calixarenes, has been proved. Moreover, a pentapeptide sequence LELTE derived from a mycobacterial chaperonine protein hsp65 has been recently identified as a ligand for CD69 representing a "danger" signal for the immune system. However, this peptide is not immunoactive per se, but only after its presentation within the multivalent environment of its parent protein, or after artificial dimerization using bi- or polyfunctional reagents. In this thesis I evaluate for four newly synthesized compounds their in vitro immunological effects on cellular signalization, proliferation, natural killing of tumors and on induction of apoptotic cell death in immunocytes. The tested compounds present LELTE peptide through attachment to a cyclopeptidic RAFT scaffold (K-K-K-P-G)2 through the ε-amino groups of lysine residues, alone or in combination with a...