Role vybraných buněčných populací a molekul při zánětlivé a odhojovací reakci

Abstract

Mezenchymální kmenové buňky (MSC) představují heterogenní populaci multipotentních kmenových buněk, které je možno izolovat z různých tkání dospělého organismu. Díky svým imunomodulačním, antiapoptotickým, cytoprotektivním a diferenciačním schopnostem tvoří velmi slibný prostředek pro léčbu mnoha zánětlivých onemocnění a v regenerativní medicíně. Naším cílem bylo analyzovat terapeutický přínos MSC na modelu transplantace kožního štěpu. V experimentech jsme pro kultivaci a aplikaci MSC používali nanovlákenné nosiče. Myším kmene BALB/c byly transplantovány alogenní kožní štěpy kmene C57BL/6, které byly následně překryty nanovlákennými nosiči připravenými technologií elektrostatického zvlákňování z polymeru kyseliny mléčné (poly-L-lactic acid, PLA). Některá zvířata byla ponechána bez léčby, jiná byla léčena pomocí různých terapií kombinujících použití nanovlákenných nosičů s adherovanými MSC a nanovlákenných nosičů s inkorporovaným cyklosporinem A (CsA), nebo bez CsA. Abychom stanovili vliv MSC na imunitní odpověď, používali jsme různé metody zahrnující FACS analýzu, ELISA testy, PCR, imunohistochemické metody a Griessovu reakci. Je známo, že MSC po aplikaci migrují přednostně do zánětlivých oblastí v poškozené tkáni a rovněž do lymfatických orgánů. V naší studii se podařilo prokázat, že šest dní po...

Mesenchymal stem cells (MSC) represent a heterogenous population of multipotent stem cells that can be isolated from various tissues of adult organism. Due to their immunomodulatory, antiapoptotic, cytoprotective and differentiation capabilities, MSC hold a great promise for treatment of many inflammatory diseases and for use in regenerative medicine. We aimed to analyze the therapeutic effect of MSC in a model of skin transplantation. In our research, nanofiber scaffolds were used for application of MSC. Allogeneic skin grafts were transplanted from C57BL/6 mice to BALB/c mice and they were subsequently covered with nanofiber scaffolds prepared from poly-L-lactic acid (PLA) by the original needleless electrospun Nanospider technology. Some animals remained untreated, others were treated by specific therapies that combined usage of nanofiber scaffolds with cultivated MSC and nanofiber scaffolds with or without incorporated cyclosporin A (CsA). We used various methods, including FACS analysis, ELISA, PCR, immunohistochemistry and Griess reaction to determine effect of MSC on immune response. It has been reported that MSC home preferentially to sites of inflammation within damaged tissues and can be localised also in lymphatic organs. Six days after transplantation and local MSC application we...