Studium populací lymfocytů v tenkém střevu prasete

Abstract

7 1. ABSTRAKT Prase je historicky řazeno ke skupině živočichů, které využívají určité části tenkého střeva k tvorbě plně rozvinutého primárního B buněčného repertoáru. Tvorba takového primárního B buněčného repertoáru je nezávislá na výskytu antigenu a připomíná primární lymfopoetickou aktivitu ptačí Fabriciovy bursy. Některé nálezy však toto zařazení prasat zpochybňují. Tato diplomová práce se zaměřuje na studium lymfocytů a jejich subpopulací v tenkém střevu mladých bezmikrobních a konvenčních selat s cílem zjistit, zda zastoupení lymfocytů je nebo není závislé na kolonizaci střeva. Pomocí průtokové cytometrie bylo též zjišťováno, zda existuje výrazný rozdíl mezi jednotlivými oblastmi tenkého střeva který by naznačoval, že prasata používají určité oblasti střeva pro vývoj B buněčného repertoáru. Současně byl pomocí analýzy nukleových kyselin zjišťován stav izotypového přesmyku u B lymfocytů izolovaných z různých částí tenkého střeva. Výsledky souhrně naznačují, že kolonizace střeva má zásadní vliv na vývoj všech základních populací lymfocytů i některých jejich subpopulací. Největší vliv kolonizace byl pozorován u B lymfocytů a jejich subpopulací. Na druhou stranu nebylo prokázáno, že distribuce lymfocytů v určitých oblastech tenkého střeva se zcela zásadně liší od jiných oblastí tenkého střeva. I když za...

8 ABSTRACT Historically pig is allocated to a group of animals which use certain parts of their small intestine to acquire a fully developed primary B cell reperoire. Development of such primary repertoire is independent on the antigen presence and resembles the primary lymphopoietic activity of avian bursa of Fabricius. However, some findings concernig the pig's alignment in the above mentioned group suggest otherwise. This graduation thesis is focused on the investigtion of lymphocyte populations and subpopulations in the small intestine of germ-free and conventional piglets. The aim is to determine whether the percentage amounts of lymphocyte populations is dependent on the intestinal colonization. Using Flow Cytometry the significant differences between individual samples were assesed allowing us to conclude which parts of the small intestine could possibly be used for the development of B cell repertoire. Moreover, the status of isotype switching of B lymphocytes isolated from different intestinal parts was determined by the means of PCR analysis. Our data suggest that the small intestine colonization has a crucial role in development of all the main lymphocyte populations as well as some of their subpopulations. The greatest influence of colonization was observed concerning B lymphocytes and their...