Vývoj terapeutického prostředku pro pasivní imunizaci nemocných cystickou fibrosou

Abstract

Cystická fibróza (CF) je jedním z nejčastějších dědičných onemocnění. Toto vrozené onemocnění, způsobené mutací genu produkujícího protein CFTR, postihuje zejména dýchací a trávicí soustavu. Z hlediska ohrožení života je nejzávažnější postižení respiračního systému. Pacienti s CF trpí opakovanými infekcemi, které vedou k rozvoji chronického zánětu a postupné destrukci plicní tkáně. Typickým specifickým mikroorganismem kolonizujícím plíce pacientů s CF je Pseudomonas aeruginosa. Právě infekce plic vyvolané tímto mikroorganismem jsou nejčastější příčinou úmrtí pacientů s CF. V současnosti jsou nejčastěji v terapii infekcí P. aeruginosa používána antibiotika. Vzhledem ke vzniku rezistencí jsou však hledány nové možnosti terapie. Jednou z možností je pasivní imunizace CF pacientů pomocí specifických slepičích protilátek proti P. aeruginosa. Pro sledování vlivu IgY na adhezi bakterií P. aeruginosa na buňky plicního epitelu bylo potřeba nalézt vhodný modelový systém. V této souvislosti byl hledán objektivní způsob vyhodnocení těchto adhezních testů založený na vizualizaci bakterií P. aeruginosa a plicních epiteliálních buněk. Nejprve bylo testováno značení bakterií P. aeruginosa pomocí sloučenin CellTracker, resazurinu, FITC a následně také pomocí barviva PKH 26. Značení plicních epiteliálních buněk bylo...

Cystic Fibrosis (CF) is one of the most common heriditary diseases. This congenital condition, caused by CFTR gene mutation, affects gastrointestinal and respiratory system especially. The affection of respiratory system is considered the most serious life-threatening symptom. Pacients suffer from reccurent infections proceeding to the development of chronic inflammation and progressive pulmonary tissue destruction. A typical specific microoganism colonizating pulmonary tissue of thouse suffering from CF is recognised as Pseudomonas aeruginosa. Pulmonary infections caused by this microorganism are the most often cause of death in patients suffering from CF. Antiobiotics are the first-line therapy of this condition currently. Nevertheless, the need to find alternatives occurs due to antibiotics resistance development. Passive immunization by specific hen-egg-yolk antibodies against P. aeruginosa is a possible alternative. An observation of IgY influence on a bacterial adhesion to pulmonary epithelial cells required an appropriate model. In this context an appropriate adhesion testing method based on P. aeruginosa and pulmonary epithelial cells visualisation was searched. At first bacterial cells labelling was tested by CellTracker, resazurin, FITC and consequently PKH 26. P. aeruginosa fluorescent...