Regulácia tvorby cytokínu IL-33 a jeho biologické účinky.

Abstract

Interleukín 33 je proteín s duálnou funkciou, ktorý slúži súčasne ako prozápalový cytokín a zároveň funguje ako intracelulárny jadrový faktor. V úlohe cytokínu sa IL-33 naväzuje na ST- 2 receptor a v cieľových bunkách, medzi ktoré patria napr. mastocyty, bazofily, eozinofily, a NK-bunky indukuje produkciu cytokínov spojených s Th2 typom imunitnej odpovede. Ako jadrový faktor sa naväzuje na chromatín a reguluje transkripciu niektorých prozápalových génov. Regulácia týchto procesov zatiaľ nie je známa, uspokojivo objasnené nie sú ani mechanizmy zodpovedné za syntézu, štiepenie a sekréciu IL-33. Cieľom našej práce bolo preveriť viaceré mechanizmy, ktoré by sa mohli podieľať na regulácii produkcie IL-33 a jeho sekrécie mimo bunku. Najskôr sme zisťovali, či má na sekréciu IL-33 vplyv stimulácia prostredníctvom cytokínov TNFα, IFN γ, IL-1β, IL-13, IL-33, TGF-β a IL-10 alebo stimulácia prostredníctvom LPS izolovaného z E. coli. Ďalej sme overovali, či IL-33 patrí medzi tzv. alarmíny, takže by mal byť z buniek uvoľňovaný pri poškodení či nekróze. Bunky boli stimulované prostredníctvom LPS a nekrózu sme indukovali pomocou viacerých cyklov zmrazovania a rozmrazovania. Okrem prítomnosti IL-33 bola testovaná aj prítomnosť cytokínov IL-1α a IL-1β. V našich experimentoch sme ako modelové bunky používali bunkovú...

IL-33 is a dual function protein that may function as both a proinflammatory cytokine and an intracellular nuclear factor. In a role of cytokine IL-33 signals via receptor ST2 and induces T helper type 2-associated cytokines in its target cells including mast cells, basophils, eosinophils and natural killer cells. Additionally, it acts as chromatin-associated nuclear factor with transcriptional regulator properties affecting expression of some proinflammatory cytokines. Regulation of this processes is poorly understood, mechanisms underlying synthesis, processing and secretion of IL-33 also remain to be fully explored. The aim of our study was to examine mechanisms probably involved in regulation of IL-33 production and its secretion outside the cell. First, we investigated possibility that IL-33 secretion is affected by stimulation with cytokines TNFα, IFN γ, IL-1β, IL-13, IL-33, TGF-β and IL-10 or stimulation with LPS isolated from E. coli. Next we investigated hypothesis that IL-33 is released from cells during cell damage or necrosis and serve as "alarmin". Necrosis was induced in LPS-stimulated cells by freeze-thawing cycles. Besides the presence of IL-33 we tested levels of IL-1α and IL-1β. In our experimental model, we used A549 cell line (alveolar type II-like cells), THP-1 promonocytic...