Přestavby genů pro imunoglobuliny a sledování minimální reziduální nemoci u B-lymfoproliferativních onemocnění.

Abstract

Maligní lymfomy jsou nádorová onemocnění, která vznikají klonální proliferací lymfocytů zastavených v určitém stupni diferenciace. Všechny nádorové buňky vzniklé z původního klonu tedy sdílejí stejné charakteristiky a toho je možno využít při jejich detekci. Nalezení vhodných molekulární znaků nádorových buněk je základním krokem nejen pro diagnostiku onemocnění, ale také pro sledování minimální reziduální nemoci. Minimální reziduální nemoc je definována jako subklinická úroveň nemoci, kdy v průběhu terapie již maligní buňky nejsou běžnými cytologickými metodami detekovatelné. Právě tyto reziduální buňky, které unikly léčbě, mohou způsobit relaps onemocnění. Hlavní cíle diplomové práce jsou detekce a analýza přestaveb genů pro imunoglobuliny a chromozomální translokace t(11;14) v oblasti MTC, a zavedení a optimalizace RQ-PCR systému pro detekci minimální reziduální nemoci. Kvantifikace klonálních přestaveb popřípadě chromozomální translokace umožňuje detekci hladiny minimální reziduální nemoci u pacientů s maligními lymfomy. U 19 pacientů s maligními lymfomy byly analyzovány klonální přestavby genů pro imunoglobuliny, respektive charakteristická chromozomální translokace. Byly analyzovány jednotlivé genové segmenty, přechodové oblasti a kombinační variabilita v cílových přestavbách...

Malignant lymphomas are tumors arising by clonal proliferation of lymphocytes stopped at a specific stage of differentiation. All tumor cells arising from the original clone thus share the same characteristics and that can be used in their detection. Finding a suitable molecular marker of tumor cells is an essential step not only to disease diagnosis, but also for monitoring of minimal residual disease. Minimal residual disease is defined as the subclinical disease level, which malignant cells are not detectable for conventional cytological methods during the therapy. These residual cells can cause relapse. The main goals of the diploma thesis are a detection and analysis of immunoglobulin genes rearrangement and chromosomal translocation t(11; 14) in the MTC region, and a development and optimization of RQ-PCR system for detection of minimal residual disease. Quantification of clonal rearrangement or chromosomal translocation allows the detection of minimal residual disease level in patients with malignant lymphomas. Clonal immunoglobulin genes rearrangement or characteristic chromosomal translocation were analyzed in 19 patients with malignant lymphomas. There were analyzed individual gene segments, N-region and combination variability in immunoglobulin genes rearrangement. There was developed...