Fetální mikrochimérismus u gynekologických malignit.

Abstract

Existence fetálního mikrochimérismu byla prokázána před mnoha lety. Tento fenomén je spojen s pozorováním, že v jednom jedinci jsou přítomny dvě nebo více geneticky odlišné populace buněk. Fetální mikrochimérismus vzniká přirozeně v průběhu každého těhotenství obousměrným přechodem buněk přes placentu z plodu do matky (fetální mikrochimérismus) a z matky do plodu (maternální mikrochimérismus). U některých žen jsou fetální buňky detekovány i desítky let po ukončení těhotenství. Ve své práci jsem prokázala přítomnost fetálního mikrochimérismu ve tkáních nádorů endometria, prsu a ovaria a také v tkáních kontrolních, bez malignizace. Pracovala jsem s tkáněmi hluboce zmraženými, nativními a buněčnými kulturami vytvořenými z nativních tkání. Původně měly být analyzovány také tkáně zalité v parafínu, které se ovšem ukázaly jako nevhodný typ vzorku pro detekci fetálních buněk. Naopak nativní a hluboce zmražené tkáně nádorů a kontrol jsou pro tento typ výzkumu vhodné a fetální mikrochimérismus byl v části vzorků nalezen. K detekci a amplifikaci extrahované DNA z tkání a buněčných kultur jsem použila kvantitativní PCR v reálném čase a jako marker fetálních buněk gen SRY nacházející se na Y chromozomu. Detekovala jsem tak přítomnost fetálních mužských buněk. Fetální genom byl nalezen jak v tkáních nádorů, tak...

The existence of fetal microchimerism has been demonstrated many years ago. This phenomenon is associated with observation of two or more genetically different populations of cells present in one person. Fetal microchimerism originates naturally during pregnancy, by bidirectional transfer of the cells through placenta from fetus to mother (fetal microchimerism) and from mother to fetus (maternal microchimerism). In some cases fetal cells persisted in mother for decades after pregnancy. In my thesis I showed the presence of fetal microchimerism in tissues of endometrial cancer, breast cancer and ovarian cancer and in control, nonmalignant tissues. I worked with deep-frozen tissues, native tissues and cell cultures created from native tissues. I planed also the analysis of paraffin-embedded tissues; however this type of material showed to be unusable for fetal cells detection. On the contrary, native and deep-frozen tumor and control tissues are suitable for this type of research and fetal microchimerism was observed in part of samples. For detection and amplification of DNA extracted from tissues and cell cultures I used quantitative real-time PCR and SRY gene located on the Y chromosome as a marker of fetal cells. I detected the presence of male fetal cells. Fetal genome was found in both tumor and...