Úloha glykoproteinu NG2 v regulaci Rho/ROCK signalizace.

Abstract

NG2 je transmembránový glykoprotein, jehož exprese je spojena především s vyvíjející se tkání, a bývá také obnovena v nádorových buňkách. Glykoprotein NG2 je důležitým regulátorem buněčné migrace a adheze a jeho nadprodukce, popsaná u řady nádorů, zvyšuje metastatický potenciál takových nádorů. Molekulární mechanizmy tohoto působení však dosud nejsou zcela objasněny. V poslední době přibývá indicií, že je glykoprotein NG2 schopen regulace Rho/ROCK signalizace, jejíž zvýšená aktivace je nezbytnou podmínkou efektivní invaze améboidních nádorových buněk. V rámci této práce je analyzována úloha glykoproteinu NG2, zejména jeho PDZ- vazebného motivu pro indukci améboidního fenotypu a aktivaci Rho/ROCK signalizace. Naše výsledky dokládají význam PDZ-vazebného motivu NG2 pro mezenchymálně- améboidní přechod buněk ve 3D prostředí. Překvapivě ale ukazují, že produkce jak celé cytoplazmatické domény NG2, tak její zkrácená verze bez PDZ-vazebného motivu, nevede ke změnám v množství Rho-GTP a aktivaci signální dráhy Rho/ROCK ve 2D prostředí.

NG2 is a transmembrane glycoprotein mainly expressed in developing tissue, and often re-expressed in tumor cells. NG2 glycoprotein is an important regulator of cell migration and adhesion. Increased expression of NG2 enhances the metastatic potential of cancer cells. However, the molecular mechanisms of these processes are still not fully understood. An increasing number of evidences, in recent years, have shown that NG2 can be responsible for Rho/ROCK activation, which is essential for effective amoeboid invasiveness. In this thesis, we analysed the role of NG2 glycoprotein, especially the role of its PDZ- binding motif on amoeboid phenotype induction, and activation of Rho/ROCK signaling. Our results demonstrate the importance of the NG2 PDZ-binding motif on mesenchymal- amoeboid transition of cells in a 3D environment. Surprisingly, they show that the expression of both the NG2 cytoplasmatic domain and the truncated version, lacking the PDZ-binding motif, do not change the amount of Rho-GTP or the activation of the Rho/ROCK signaling pathway in 2D.