Beta-adrenergní signalizace v myokardu potkana při dlouhodobém podávání morfinu

Abstract

1. Abstrakt Cílem této práce bylo zhodnotit vliv nízkých dávek (0,1 mg/kg, 1 mg/kg, 1 mg/kg na den po dobu 28 dní + 7 dní abstinence) a vysokých dávek (10 mg/kg na den po dobu 10 dní) morfinu na signalizaci, která je zprostředkována receptory spřaženými s G-proteiny (GPCRs) v myokardu potkana. Mezi významné receptory z této skupiny patří opioidní receptory (OR) a hlavně β-adrenergní receptory (β-AR). Nejpočetnějšími OR v srdeční tkáni jsou δ-OR a κ-OR. Výsledky studie těchto dvou OR v této diplomové práci naznačují, že v myokardu po ovlivnění morfinem nedochází k signifikantním změnám v expresi δ-OR ani κ-OR při podání žádné ze studovaných dávek. Srdeční tkáň obsahuje všechny tři dosud známé typy β-AR (β1-AR, β2-AR a β3-AR). Důraz byl v diplomové práci kladen hlavně na studium exprese β1-AR a β2-AR, neboť bylo zjištěno, že právě tyto dva podtypy β-AR se podílejí na většině signalizačních drah ovlivňujících kardiovaskulární systém. Použitím techniky imunoblotu nebyly nalezeny žádné výraznější změny v expresi β1-AR a exprese β2-AR se poněkud snížila po použití dávky 10 mg/kg po dobu 10 dní. Senzitivnější saturační vazebné pokusy s použitím neselektivního β-antagonisty [3 H]CGP 12177 odhalily signifikantní nárůst specifické vazby při podání morfinu v dávce 1 mg/kg/den po dobu 28 dní a po následné 7-denní...

2. Abstract The aim of this dissertation was to evaluate the effect of low doses (0,1 mg/kg, 1 mg/kg, 1 mg/kg per day for 28 days + 7 days of abstinence) and high doses (10 mg/kg per day for 10 days) of morphine on transmembrane signaling mediated by G-protein coupled receptors (GPCRs) in the rat myocardium. Opioid receptors (OR) and mainly β-adrenergic receptors (β-AR) belong to the most important receptors of this receptor family. δ-OR and κ-OR are the most numerous OR in the myocardium. Results of the present work indicated that there are no significant changes in the expression of these two receptor subtypes after any studied doses of morphine. There are three subtypes of β-AR (β1-AR, β2-AR and β3-AR) represent in the myocardial tissue. Here we studied the expression of β1-AR and β2-AR, because these two major subtypes of β-AR regulate through their signaling pathways functioning of the cardiovascular system. Our immunoblot analysis did not reveal any changes in the expression of β1-AR, but the expression of β2-AR was significantly decreased after treatment with morphine at the dose of 10 mg/kg for the 10 days. More sensitive saturation binding experiments with the nonselective β-antagonist [3 H]CGP 12177 indicated a significant increase in specific binding after treatment with morphine (1 mg/kg/day for...