Využití UHPLC v analýze rozkladných produktů tertrakain-hydrochloridu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Horáková Školitel: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D Název diplomové práce: Využití UHPLC v analýze rozkladných produktů tetrakain- hydrochloridu Tato diplomová práce se zabývá využitím UHPLC pro analýzu tetrakain-hydrochloridu a jeho rozkladných produktů, kyseliny 4-aminobenzoové a 4-(butylamino)benzoové. Analýza probíhala na koloně Kinetex 5 µ XB-C18 100A za využití mobilní fáze acetonitril-pufr, kdy pufr obsahoval vodu upravenou kyselinou fosforečnou na pH=2,2, při průtoku 1,7 ml/min. Byla zvolena gradientová eluce, která začínala na 35% acetonitrilu, ve druhé minutě stoupla na 90% organické fáze a poté opět klesla na 35% ve čtvrté minutě. Jako vnitřní standard byl využit ethylparaben. Pro detekci byla zvolena vlnová délka 300 nm pro tetrakain a nečistoty a 240 nm pro vnitřní standard. Validace dokázala, že metoda poskytuje přesné a správné výsledky.

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Michaela Horáková Supervisor: Ludmila Matysová Title of Diploma Thesis: Determination of Degradation Product of Tetracaine hydrochloride by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography This diploma thesis deal with using UHPLC for determination of tetracaine hydrochloride and its degradation products, p-aminobenzoic acid and p-n-butylaminobenzoic acid. Separation was achieved by using Kinetex 5 µ XB- C18 100A column and the eluent, acetonitrile-buffer, when buffer containing water with phosphoric acid (pH=2.2) at a flow rate of 1.7 ml/min. Gradient elution was chosen, which began at 35 % of acetonitrile, in the second minute rised to 95 % of organic phase, and then descended to 35 % in the fourth minute. Ethylparaben was used as an internal standard. The wavelengths 300 nm for tetracaine hydrochloride and its degradation products, and 240 nm for internal standard were chosen for detection. Validation approved that this method provides accurate and precise results.