dc.contributor.advisor | Solich, Petr | |
dc.creator | Pospíchalová, Naďa | |
dc.date.accessioned | 2021-05-20T13:34:06Z | |
dc.date.available | 2021-05-20T13:34:06Z | |
dc.date.issued | 2015 | |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/20.500.11956/76670 | |
dc.description.abstract | α-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000 g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100 4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm. | cs_CZ |
dc.description.abstract | α-Tocopherol is the principal membrane antioxidant in mammalian cells, although antioxidant is not the only mechanism of this vitamin. Many studies consider erytrocyte α-tocopherol levels to be more suitable to assess the tocopherol status of organism than its plasma levels. This thesis presents erytrocyte membranes α-tocopherol HPLC-UV analysis with diferential ultracentrigation and solid phase extraction sample pretreatment. Red cell samples were ultracentrifuged (288 000 × g, 3 minutes, 4 řC) in the presence of butylated hydroxytoluene (BHT), D-mannitol, HEPES and CaCl2. Then α-tocopherol was extracted from erytrocyte membranes by solid phase extraction with n-hexane in the presence of ascorbic acid and tocopherol acetate internal standard. The extract was dissolved in methanol and separated on the monolithic column Chromolith Performance RP-18e (100 4.6 mm) using a 100% methanol as the mobile phase. The absorbance of α-tocopherol was measured at 295 nm wavelength. | en_US |
dc.language | Čeština | cs_CZ |
dc.language.iso | cs_CZ | |
dc.publisher | Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové | cs_CZ |
dc.title | Úprava biologického materiálu před HPLC analýzou - stanovení alfa tokoferolu v erytrocytární membráně | cs_CZ |
dc.type | rigorózní práce | cs_CZ |
dcterms.created | 2015 | |
dcterms.dateAccepted | 2015-11-10 | |
dc.description.department | Katedra analytické chemie | cs_CZ |
dc.description.department | Department of Analytical Chemistry | en_US |
dc.description.faculty | Faculty of Pharmacy in Hradec Králové | en_US |
dc.description.faculty | Farmaceutická fakulta v Hradci Králové | cs_CZ |
dc.identifier.repId | 158498 | |
dc.title.translated | Treatment of biological samples before HPLC analysis - determination of alfa-tocoferol in erythrocyte membrane | en_US |
dc.contributor.referee | Matysová, Ludmila | |
dc.identifier.aleph | 002052339 | |
thesis.degree.name | RNDr. | |
thesis.degree.level | rigorózní řízení | cs_CZ |
thesis.degree.discipline | Specialist in Laboratory Methods | en_US |
thesis.degree.discipline | Odborný pracovník v laboratorních metodách | cs_CZ |
thesis.degree.program | Healthcare bioanalytics | en_US |
thesis.degree.program | Zdravotnická bioanalytika | cs_CZ |
uk.thesis.type | rigorózní práce | cs_CZ |
uk.taxonomy.organization-cs | Farmaceutická fakulta v Hradci Králové::Katedra analytické chemie | cs_CZ |
uk.taxonomy.organization-en | Faculty of Pharmacy in Hradec Králové::Department of Analytical Chemistry | en_US |
uk.faculty-name.cs | Farmaceutická fakulta v Hradci Králové | cs_CZ |
uk.faculty-name.en | Faculty of Pharmacy in Hradec Králové | en_US |
uk.faculty-abbr.cs | FaF | cs_CZ |
uk.degree-discipline.cs | Odborný pracovník v laboratorních metodách | cs_CZ |
uk.degree-discipline.en | Specialist in Laboratory Methods | en_US |
uk.degree-program.cs | Zdravotnická bioanalytika | cs_CZ |
uk.degree-program.en | Healthcare bioanalytics | en_US |
thesis.grade.cs | Uznáno | cs_CZ |
thesis.grade.en | Recognized | en_US |
uk.abstract.cs | α-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000 g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100 4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm. | cs_CZ |
uk.abstract.en | α-Tocopherol is the principal membrane antioxidant in mammalian cells, although antioxidant is not the only mechanism of this vitamin. Many studies consider erytrocyte α-tocopherol levels to be more suitable to assess the tocopherol status of organism than its plasma levels. This thesis presents erytrocyte membranes α-tocopherol HPLC-UV analysis with diferential ultracentrigation and solid phase extraction sample pretreatment. Red cell samples were ultracentrifuged (288 000 × g, 3 minutes, 4 řC) in the presence of butylated hydroxytoluene (BHT), D-mannitol, HEPES and CaCl2. Then α-tocopherol was extracted from erytrocyte membranes by solid phase extraction with n-hexane in the presence of ascorbic acid and tocopherol acetate internal standard. The extract was dissolved in methanol and separated on the monolithic column Chromolith Performance RP-18e (100 4.6 mm) using a 100% methanol as the mobile phase. The absorbance of α-tocopherol was measured at 295 nm wavelength. | en_US |
uk.file-availability | V | |
uk.grantor | Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra analytické chemie | cs_CZ |
thesis.grade.code | U | |
uk.publication-place | Hradec Králové | cs_CZ |
uk.thesis.defenceStatus | U | |
dc.identifier.lisID | 990020523390106986 | |