HPLC stanovení potenciálních léčiv

Abstract

1 ABSTRACT Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biophysics and Physical Chemistry Candidate: Karolina Palickova Consultant: Ing. Vladimir Kubicek, CSc. Title of Thesis: HPLC Determination of Potencial Drugs The diploma thesis describes selection of the most suitable conditions for HPLC determination of a recently prepared potential bronchodilatans. The aim of the thesis was to find a suitable isocratic method for the HPLC determination of the substance in rat plasma to be used during pharmacokinetic experiments. The chromatographic column Ascentis® Express RP - Amide was utilized. Best results were achieved with mobile phase consisting of acetonitrile and phosphate buffer (pH = 3,0) in volume ratio 12:88. The column was thermostated at 20 řC. Fluorescence detection (λex = 228 nm, λem = 380 nm) was applied to get a sufficient sensitivity. 4-quinazolinole was chosen as an internal standard. Biological samples were processed by LLE before the HPLC analyses. The proposed method was validated successfully and then employed in pharmacokinetic studies.

1 ABSTRAKT Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Karolína Paličková Konzultant: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Název diplomové práce: HPLC stanovení potenciálních léčiv Diplomová práce popisuje hledání nejvhodnějších podmínek pro stanovení nově připraveného potenciálního bronchodilatancia pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Cílem bylo najít vhodnou isokratickou metodu pro HPLC stanovení této látky v potkaní plazmě, která by mohla být využita při farmakokinetických experimentech. Byla použita kolona Ascentis® Express RP - Amide. Nejlepších výsledků bylo dosaženo se složením mobilní fáze acetonitril a fosfátový pufr (pH = 3,0) v poměru 12:88. Kolona byla termostatována na 20 řC. Byla zvolena fluorescenční detekce (λex = 228 nm, λem = 380 nm) k dosažení dostatečné citlivosti. Vnitřním standardem byl 4- chinazolinol. Před provedením HPLC analýz byly biologické vzorky zpracovány metodou LLE. Metoda byla úspěšně validována a použita k farmakokinetickým studiím.